Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas antibakteri, konsentrasi hambat minimum (KHM) dan konsentrasi bakteriasidal minimum (KBM) dari ekstrak etanol dan fraksi daun mahkota dewa terhadap Staphylococcus aureus, serta mengidentifikasi kandungan senyawa yang berperan sebagai senyawa antibakteri. Pada penelitian ini digunakan metode ekstraksi maserasi dan fraksinasi cair-cair untuk mendapatkan ekstrak etanol dan fraksi daun mahkota dewa. Metode difusi cakram digunakan untuk menentukan aktivitas antibakteri, metode dilusi padat untuk menentukan KHM dan KBM, serta dilakukan identifikasi senyawa menggunakan kromatografi lapis tipis.