Penelitian ini dilakukan dengan beberapa tahapan: mengisolasi bakteri dari tiga lokasi pengambilan sampel, melakukan uji kemampuan bakteri dalam mendegaradasi oli bekas pada media Bushnell-Hass, mengidentifikasi secara mikroskopis, isolasi DNA dan identifikasi isolat DNA Analisis Gen 16S rRNA. Analisis filogenetik untuk mengetahui identitas bakteri. Diperoleh dua isolat terbaik yaitu isolat B2.1.2 dengan kemampuan dalam mendegradasi oli sebesar 10,35%. Hasil analisis filogenetik menunjukkan bahwa isolat B2.1.2 memiliki kekerabatan dengan Stenotrophomonas acidaminiphila strain UC4083, dengan nilai bootstrap sebesar 64%. Isolat B3.3.4 memiliki kemampuan mendegradasi oli sebesar 9,99%, isolat tersebut memiliki kekerabatan dengan Bacillus sp. A2109, dengan nilai bootstrap sebesar 73%.